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網(wǎng)狀纖維染色液

點擊下載該文件    日期:2015/6/8 15:44:40

 
(改良Gordon-Sweets法)
網(wǎng)狀纖維染色液
產(chǎn)品簡介:
      網(wǎng)狀纖維(Reticular fiber)是網(wǎng)狀結(jié)締組織內(nèi)的一種纖維,由網(wǎng)狀細胞所產(chǎn)生,直徑多在0.2~1.0μm,有韌性而沒有彈性。網(wǎng)狀纖維的染色方法很多,但染色原理基本一致,大都采用氨銀浸法。改良Gordon-Sweets 染色原理是利用氨銀液易被組織吸附與組織的蛋白質(zhì)結(jié)合,經(jīng)甲醛還原成黑色或棕黑色的金屬銀,沉積于組織內(nèi)及其表面。傳統(tǒng)方法中還原后先采用氯化金調(diào)色,再用硫代硫酸鈉溶液洗去組織上未還原的銀鹽,本改良法省略該步驟,
使網(wǎng)狀纖維對比得更清晰。
     Jisskang 網(wǎng)狀纖維染色液(改良Gordon-Sweets法)主要經(jīng)過氧化、漂白、媒染、浸銀、
還原、復(fù)染等步驟,與改良 Gomori法不同之處在于前者采用酸性氧化劑和核固紅復(fù)染液。
冰凍切片、低溫切片和火棉膠切片均可用于網(wǎng)狀纖維染色。各種固定液均可采用,重金屬汞
鹽或鋨鹽固定液偶爾會產(chǎn)生一些非特異性銀背景。常用于鑒別腫瘤的性質(zhì)和來源、癌與肉瘤、
淋巴肉瘤與網(wǎng)狀細胞肉瘤、血管內(nèi)皮瘤與血管外皮瘤、骨尤文瘤與骨網(wǎng)狀細胞肉瘤、腦膜瘤
與星形細胞瘤、惡性神經(jīng)鞘瘤及早期浸潤癌等。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品
6*50ml
Storage
試劑(A):Gordon-Sweets氧化劑
A1:GS氧化劑A
25ml
RT
A2:GS氧化劑B
25ml
RT
臨用前,取A1、A2等量混合即為Gordon-Sweets氧化劑,即配即用。
試劑(B):草酸溶液
50ml
RT
試劑(C):硫酸鐵銨溶液
50ml
RT
試劑(D):Gordon-Sweets銀氨溶液
50ml
4℃避光
試劑(E):Gordon-Sweets還原劑
50ml
RT
試劑(F):核固紅染色液
50ml
RT避光
使用說明書
1份
 
自備材料:
1、10%福爾馬林固定液
2、染色架
3、蒸餾水
操作步驟(僅供參考):
1、組織固定于10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。
2、切片厚4μm,常規(guī)脫蠟至水。
3、把切片平置在染色架上,滴入配制好的 Gordon-Sweets氧化劑,氧化5min。
4、稍水洗。
5、草酸溶液漂白 1~2min。
6、流水沖洗 2min,蒸餾水稍洗。
7、硫酸鐵銨溶液媒染 5min。
8、稍水洗,蒸餾水稍洗。
9、滴加Gordon-Sweets 銀氨溶液染色 3min。
10、蒸餾水稍洗。
11、Gordon-Sweets 還原劑還原 1min,流水沖洗 10min。
12、核固紅染色液染細胞核 5~10min,稍水洗。
13、常規(guī)脫水透明。
14、中性樹膠封固。
染色結(jié)果:
網(wǎng)狀纖維
黑色
膠原纖維
黃色至黃棕色
細胞核
紅色
胞質(zhì)
淡黃色
注意事項:
1、玻璃器皿必須用洗滌液浸泡 1 天,自來水沖洗干凈,蒸餾水沖洗 2  次。
2、10%福爾馬林固定液是較為適合的固定液,不宜采用含汞的固定劑如 Zenker  液,否則
   易導致切片非特異性沉淀。
3、Gordon-Sweets 氨銀溶液不太穩(wěn)定,對光的敏感性強,應(yīng) 4℃避免保存,恢復(fù)至室溫
   后使用。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:3個月有效。

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