產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
鈣在人體內(nèi)大量存在，構(gòu)成骨骼作為支持人體的支架，在分泌、運(yùn)送、肌肉收縮、神經(jīng)傳導(dǎo)等也起重要作用。鈣在機(jī)體內(nèi)以?xún)煞N形式存在，一種是離子鈣，存在血液循環(huán)內(nèi)，即所謂血鈣；另一種是結(jié)合鈣，和蛋白、碳酸或磷酸結(jié)合而沉著在組織內(nèi)。除骨骼和牙齒外，正常時(shí)鈣滲透在所有組織和細(xì)胞中，一般丌以固體狀態(tài)出現(xiàn)在組織內(nèi)。但在某些情冴下，鈣析出成固體并沉著于組織內(nèi)，則為病理性鈣鹽沉著。沉著的鈣鹽主要是磷酸鈣，其次為碳酸鈣。鈣鹽通常是單折射的，但草酸鈣是雙折射的。當(dāng)使用HE染色時(shí)，鈣一般呈紫藍(lán)色。許多染料可以于鈣形成螯合物，包括茜素紅 S、紅紫素、核固紅等。茜素紅S屬一種蒽醌類(lèi)衍生物，是茜素磺酸鈉鹽，它能不碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復(fù)合物。
鈣鹽染色常用方法有硝酸銀法和茜素紅S法，Jisskang鈣鹽染色液采用Von Kossa硝酸銀法，其原理在于該法是一種金屬置換法，硝酸銀溶液作用于含有丌溶性鈣鹽的切片時(shí)，鈣被銀所置換，銀鹽在光的作用下被還原為黑色金屬銀，適用于大量樣本的鈣鹽組織染色。
自備材料：
1、10%中性福爾馬林固定液
2、系列乙醇
3、蒸餾水
4、顯微鏡
操作步驟(僅供參考)：
1、組織固定于10%中性福爾馬林，常規(guī)脫水包埋。
2、切片厚度 5μm，常規(guī)脫蠟至水。
3、蒸餾水洗 1min。
4、切片入Von Kossa硝酸銀溶液，強(qiáng)光照射15~60min(見(jiàn)注意事項(xiàng)2)。
5、蒸餾水洗 1min。
6、入海波溶液處理 2min。
7、HE染色液或Van Gieson復(fù)染細(xì)胞核。
8、常規(guī)脫水透明，中性樹(shù)膠封固。
染色結(jié)果：
鈣鹽：黑褐色至深黑色
細(xì)胞核：根據(jù)復(fù)染液不同而不同
背景：紅色
陰性對(duì)照：
1、如有必要，可做陰性對(duì)照。取另外一張連續(xù)切片脫蠟至水，置于Von Kossa對(duì)照液處理20min，流水沖洗 5min。不試驗(yàn)片一同入Von Kossa硝酸銀溶液，余下步驟同上，結(jié)果為陰性。
注意事項(xiàng)：
1、鈣鹽組織固定以中性福爾馬林為佳，不宜采用 Bouin液等酸性固定液和甲醛鈣固定液。如用常規(guī)的 10%福爾馬林固定，固定4～6h后即可進(jìn)行脫水包埋，以防止固定液酸化導(dǎo)致鈣鹽溶解。
2、作用時(shí)間取決于陽(yáng)光照射時(shí)光的強(qiáng)度和時(shí)間。如暴露于強(qiáng)光下，15min已經(jīng)足夠；如暴露于紫外燈下，10min即可；如暴露于一般光線(xiàn)下，宜適當(dāng)延長(zhǎng)曝光時(shí)間。
3、該染色法可以區(qū)分尿酸鹽和鈣鹽，其原理在于鈣鹽丌溶解于碳酸鋰溶液，尿酸鹽易溶解于碳酸鋰溶液，切片經(jīng)碳酸鋰處理后，入硝酸銀溶液并置于強(qiáng)光下，尿酸鹽呈陰性反應(yīng)。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期：6個(gè)月有效。
技術(shù)支持: