馬兜鈴為馬兜鈴科植物北馬兜鈴或馬兜鈴的干燥成熟果實。馬兜鈴具清肺降氣、止咳平喘、清腸消痔之功效，臨床上用于肺熱喘咳、痰中帶血、腸熱痔血、痔瘡腫痛等癥。
馬兜鈴酸A為馬兜鈴的活性成分之一，也是其毒性成分之一，具有抗癌、抗感染及增強吞噬細胞活性等作用。本實驗采用高效液相色譜法，以315nm為檢測波長，測定馬兜鈴生品及蜜灸馬兜鈴中馬兜鈴酸A的含量，并以此為指標說明馬兜鈴炮制的作用和意義。
實驗材料
1、儀器
炒鍋、鍋鏟、液化氣、索氏提取器、分析天平、稱量紙、粉碎機、40目篩、水浴鍋，分液漏斗（50ml）2只、容量瓶（5ml）2只、量筒（100ml）、20ml各一只，高效液相色譜儀、YWG-C18色譜柱。
2、藥品
馬兜鈴藥材，蜜煉，馬兜鈴酸A對照品，乙醇（AR），甲醇（AR),水，乙酸（AR),丙酮（AR)，甲酸（AR),氫氧化鉀（AR),乙醚（AR)，硫酸（AR).
實驗內容
1、藥材的炮制
馬兜鈴生品：取馬兜鈴藥材，除去雜質，篩去灰屑，揉碎。
密馬兜鈴：取凈馬兜鈴，加入一式兩份開水稀釋的蜜煉，伴勻，悶透，置鍋中，用文火炒至不黏手。每100KG藥材用蜜煉25kg
含量測定
色譜條件 采用YWG-C18色譜柱（300*5mm），以甲醇-水-乙酸（70：29:1）為流動相：流速為1ml/min 紫外檢測波長為315nm
標準曲線的制備 精密吸取馬兜鈴酸A對照品乙醇溶液（0.2ug/ml）2/3/4/5/6ml，分別以乙醇定容為10ml，各樣品的濃度分別為0.04/0.06/0.08/0.1/0.12ug/ml,分別進樣5ul，以峰面積為縱坐標，進樣濃度（ug/ml）為橫坐標，的回歸方程。
樣品的制備 精密稱取馬兜鈴生品及蜜灸馬兜鈴藥材粉末（40目）1.5g于兩種150ml索氏提取器中，分別加含10%甲酸的丙酮150ml，在85℃水浴中回流提取5h。提取液回收至干，用0.5%NaOH液15ml使其完全轉移至分液漏斗中，調PH=2,用乙醚萃取4此，每次15ml，合并萃取液，水浴上蒸干，用乙醇定容于5ml容量瓶中，得供試液。
樣品的測定 取兩種供試液5ul，分別進樣，測定樣品濃度（ug/ml），并計算含量。
含量%=C*5/(W*10六次方）*100%
注 C為所測得 的樣品濃度（ug/ml）
W為取樣量(g)
原創(chuàng)作者：青島捷世康生物科技有限公司
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