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單克隆抗體的生產(chǎn)

點(diǎn)擊次數(shù):1675 日期:2016/1/25 15:32:39

       為了在實(shí)驗(yàn)室中能無限制造針對某一種抗原的特定抗體,要求從一種動物的B淋巴細(xì)胞中分離出相關(guān)克隆,并使之不滅。克隆,可在實(shí)驗(yàn)室條件下用細(xì)胞培養(yǎng)的方法來分離和使之增長。在此方式下,被克隆的B淋巴細(xì)胞將能連續(xù)地生產(chǎn)抗體,這些抗體又可以從細(xì)胞培養(yǎng)液的上清液中收集到。但是,人們想在實(shí)驗(yàn)室中增長B淋巴細(xì)胞克隆株的大多數(shù)嘗試都失敗了。因此迫切要求開發(fā)出某種方法,是生產(chǎn)抗體的B淋巴細(xì)胞能在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中隨意生長,很好的生長。進(jìn)口抗體。
早在七十年代已能在這種條件下生長出幾種類型的細(xì)胞。其中容易生長的一類細(xì)胞是稱為骨髓瘤或漿細(xì)胞瘤的惡性B淋巴細(xì)胞。這些惡性細(xì)胞不像它們正常的非癌細(xì)胞,他們有著使自身無限期繁殖的能力。而且,這種細(xì)胞可由克隆產(chǎn)生。也是實(shí)說,在活體外或當(dāng)注入到合適的動物體時,單細(xì)胞將增長形成克隆系。如果這種活體外增長的性質(zhì),以及骨髓瘤細(xì)胞系可以克隆增殖的這種性質(zhì),能和B淋巴細(xì)胞制造抗體的性質(zhì)結(jié)合起來,那末不滅的、特定的抗體生產(chǎn)將成為可能。
1975年,Kohler和Miistein證明,骨髓瘤細(xì)胞能喝B淋巴細(xì)胞融合,可得到能生產(chǎn)抗體的雜種(有關(guān)制造的技術(shù)細(xì)節(jié)和出現(xiàn)的問題將在后文闡述)。當(dāng)融合過程完成時,子細(xì)胞就稱為雜種瘤。也就是說,這是一種既繼承了來自兩親本某些特性,又能如惡性細(xì)胞那樣快速增長的雜種細(xì)胞。為此要求努力篩選出具有下述特性的雜種細(xì)胞。既有來自惡性腫瘤—骨髓瘤細(xì)胞的不滅性,又有來自B淋巴細(xì)胞能生產(chǎn)抗體的特性。這樣一來,雜交技術(shù)就能生產(chǎn)出不滅的能力產(chǎn)生免疫球蛋白的細(xì)胞。但是他們未能斷定淋巴細(xì)胞是不滅的。為此目的,Kohler和Miistein開發(fā)了用感興趣的抗原免疫他們的實(shí)驗(yàn)動物這種有獨(dú)創(chuàng)性的技術(shù)。在最初的試驗(yàn)中,他們用羊紅細(xì)胞作為抗原,不是的注射小鼠使其免疫好幾次。幾個星期后,小數(shù)的免疫系統(tǒng)打開了自己生就的B淋巴細(xì)胞克隆系,生產(chǎn)出能識別所試抗原的抗體。然后殺死小鼠,從脾臟收集淋巴細(xì)胞,以便把它用于和骨髓瘤系的融合。在此方式下融合的許多淋巴細(xì)胞想要分泌出對我們感興趣抗原的抗體。但是實(shí)際上即使使用了這種灌注動物使其生產(chǎn)特異性抗體的技術(shù),被融合的許多淋巴細(xì)胞仍將會生產(chǎn)出毫不相干的抗體。盡管如此,她使我們認(rèn)識到當(dāng)骨髓瘤和B淋巴細(xì)胞雜交成功時,若建立起來的雜種瘤裙體索生產(chǎn)的(或說單克隆抗體的)全是一種抗體,那末這種抗體就成為單克隆抗體。
   雖然上述概括的融合技術(shù)能夠無線的產(chǎn)生索規(guī)定的特異性抗體,但從一開始我們就強(qiáng)調(diào),對生產(chǎn)出的每一種成功的抗體而言,都降伴之出現(xiàn)許多不成功的融合細(xì)胞,他們將生產(chǎn)我們不需要的單克隆,F(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室的許多時間都是話費(fèi)在如何生產(chǎn)出單種有用的MCA上。其中有些原因是明顯的。首先,什么才算是一種好的單克隆。其定義是模糊的,它取決于研究者所要求的抗體具有何種功能。例如,某種抗體在識別病理學(xué)切片屬某種類淋巴細(xì)胞方面可能是非常好的,并肯呢個對組織病理學(xué)家在診斷疑難疾病中有所幫助。但是,如果這種抗體要求切片的染色僅能在嚴(yán)格規(guī)定的條件下,例如要求使用新鮮組織的這種條件下才能成功,那末該組織職能在新鮮條件下收集和測定的情況,勢必是該抗體的實(shí)際應(yīng)用極為有限。因此對一位研究者來說最重要的是,在他決定生產(chǎn)哪一種抗體之前,先要了解這種抗體對他的要求是好還是不好的。其次,研究者還難于了解的是,他企圖用來引起單克隆抗體的許多抗原常常是些很弱的免疫原。如果用了這樣的抗原,動物的免疫系統(tǒng)應(yīng)答就很差,以至于合用的單克隆的發(fā)生率很低,從而加大了工作量。
     目前市面上常見的進(jìn)口抗體有ABCAM、CST、BD、SANTA、RD等等。青島捷世康生物全面代理,且保證正品行貨,杜絕非正規(guī)渠道的水貨,保證科研工作者的每筆經(jīng)費(fèi)都能用在刀刃上。

原創(chuàng)作者:青島捷世康生物科技有限公司

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