葉綠素（Chlorophyll）檢測試劑盒（比色法）

點擊次數(shù)：1316　日期：2018/7/9 16:03:12

葉綠素(Chlorophyll)檢測試劑盒(比色法)

產(chǎn)品簡介：

葉綠體(Chloroplast)是光合作用的細(xì)胞器，在光合作用研究中，常需要用提取的葉綠體展開下游研究工作。葉綠體中所含的色素主要有兩大類，葉綠素(包括葉綠素 a 和葉綠素b)和類胡蘿卜素(包括胡蘿卜素和葉黃素)，它們與類囊體膜上的蛋白質(zhì)結(jié)合，成為色素蛋白復(fù)合體，其中葉綠素又稱葉綠體色素(Chlorophyll)。

葉綠素(Chlorophyll)檢測試劑盒(比色法)檢測原理是葉綠素不溶解于水，而溶于有機(jī)溶劑，以有機(jī)溶劑粗提葉綠素，根據(jù)朗伯-比爾定律，某有色溶液的吸光度(A)與其中溶質(zhì)濃度(C)和液層厚度(L)成正比，即A=αCL，其中α為比例常數(shù)，當(dāng)溶液濃度以百分比濃度為單位，層液厚度為1cm 時，α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。在本試劑盒情況下，葉綠素a和葉綠素b在 665nm、649nm處有最大吸收波，根據(jù)經(jīng)驗公式可計算出葉綠素 a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量。該試劑盒主要用于植物組織中葉綠素的提取以及定量檢測葉綠素a、葉綠素b及總?cè)~綠素含量。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

產(chǎn)品組成	規(guī)格	Storage
試劑(A): Chlorophyll Assay buffer	500ml	RT
試劑(B): 提取粉劑	3g	RT
使用說明書	1份

自備材料：

1、研缽或勻漿器

2、離心管

3、濾紙或紗布

4、比色杯

5、分光光度計
操作步驟(僅供參考)：

1、葉綠素提�。�

①取菠菜或其他植物新鮮葉片，洗凈，擦干，去中脈，稱取剪碎的新鮮樣品 0.1g，置于研缽或勻漿器，加入少量提取粉劑(約 50mg)和 1mlChlorophyll Assay buffer，研磨或勻漿成液態(tài)。

②將研磨液或勻漿液轉(zhuǎn)移至 10ml 離心管，用少量葉綠素提取液沖洗研缽或勻漿器數(shù)次，最后連殘渣一同倒入 10ml 離心管，補(bǔ)加 Chlorophyll Assay buffer 至 10ml，混勻，避光放置 5min-2h。

③觀察底部組織殘渣接近于白色，即為提取完全，如果仍有較多組織顏色，應(yīng)再加入Chlorophyll Assay buffer 繼續(xù)避光放置。

④濾紙或三層紗布過濾，留取濾液，即為葉綠素粗提液。

2、分光光度計測定：取葉綠素粗提液加入光徑為 1cm 的比色杯，以 Chlorophyll Assay buffer 調(diào)零，測定粗提液在 665nm、649nm 處吸光度(A665、A649)。

計算：

葉綠素 a 含量(mg/g)=Ca×V×N/(W×1000)

葉綠素 b 含量(mg/g)=Cb×V×N/(W×1000)

總?cè)~綠素含量(mg/g)=CT×V×N/(W×1000)

式中：Ca=13.95×A665-6.88×A649

Cb=24.95×A649-7.32×A665

CT=6.63×A665-18.07×A649

V=葉綠素粗提液體積(ml)=10(ml)

N=稀釋倍數(shù)

W=樣品鮮重或干重(g)

注意事項：

1、為了避免葉綠素見光分解，操作時應(yīng)盡量避光，研磨或勻漿時應(yīng)盡量縮短時間。

2、測定吸光度值大于 1 時，可適當(dāng)稀釋后再行測定。

3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期：12個月有效。

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