(二)懸浮細胞
1 離心收集細胞樣品于1.5ml離心管內棄液，加入Hoechst固定液0.5ml,緩緩懸起細胞,固定10min或更長時間(亦可4℃過夜).
2 低速離心去除固定液,用PBS或生理鹽水洗2次,每次3min,吸盡液體.洗滌時用手晃動數次.
3 低速離心離心后吸去大部分液體保留50ul液體,在緩緩懸起細胞,滴加至載玻片上,盡量使細胞分布均勻.
4 稍晾干,使細胞貼在載玻片上不易隨液體流動.
5 均勻滴上Hoechst 33258 染色液0.5ml,孵育5分鐘.用吸水紙從邊緣吸去液體,微晾干.
6 棄染色液,用PBS或生理鹽水洗2次,每次3min,吸盡液體.洗滌時宜用搖床,或手動晃動.
7 滴一滴抗熒光封片劑于載玻片上,蓋上一清潔的蓋玻片,盡量避免氣泡.
8 熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核.激發(fā)波長為350nm左右,發(fā)射波長為460nm左右.
(三)組織切片
1、常規(guī)包埋切片。
2、用PBS或生理鹽水洗2次,每次3min.洗滌時手搖晃動數次。
3、均勻滴上Hoechst 33258染色液0.5ml,孵育5分鐘。
4、棄染色液,用PBS或生理鹽水洗2次.每次3min,吸盡液體.洗滌時宜用搖床,或手動晃動。
5、將切片置于載玻片上,滴一滴抗熒光封片劑,蓋上一潔凈的蓋玻片,盡量避免氣泡。
6、熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核.激發(fā)波長350nm左右，發(fā)射波長460nm左右。
注意事項:
1、熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡快檢測,使用抗熒封片劑時也應避光操作。
2、在為了獲得細胞沉淀的離心過程中,對于特殊細胞,如果細胞沉淀不充分,可以適當提高離心力或延長離心時間。
3、Hoechst 33258染色液對人體有一定刺激性,請注意適當防護。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并帶一次性手套操作。
有效期:12個月有效。亦可4℃度保存,一個月有效。
四 產品訂購說明:
  1、報價含普票、運費。
  2、科研院所常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發(fā)貨。
  3、進口原裝產品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。
  4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
  5、如需代為檢測，標本對環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內客戶）。
  6、代測免收代測費，一周出結果。
五在應用ELISA時，首先應清楚下面的內容 。
  1·是檢測抗體還是抗原。 
  2·檢測的結果是定性還是定量。 
  3·是否需要檢測特異抗體的類型。 
  4·所用抗體/單克隆抗體的親和力/親和力怎么樣 
 [1]檢測抗原
    最常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法，其次是競爭法，但競爭法
  在具體 實驗中有些困難;特別是檢測微生物的抗原，因為其需標記抗原，對于
  某些抗原很難做到甚至是不可能的。在競爭法中，沒標記的抗原與標本直接混合
  在一起，許多標本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質（例如糞便），可影響elisa結
 [2]檢測抗體 
     檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法，這個方法用于檢測特異性
   IgG,IgA盒IgM。這個方法的第一步是因相捕獲的抗體是否是特異抗原的抗體。
  間接elisa在家側IgG時比較簡單，但不適用于檢測其他種類的抗體。 
方法：不論選用哪種方法ELISA都包括6個步驟
  1·抗原或抗體吸附于固相。 
  2·加標本和試劑。 
  3·孵育和沖洗 
  4·加酶標抗原或抗體。
  5·加適當的底物。 
  6檢測和分析結果。
六 合作單位：
  中國醫(yī)科大學、復旦大學、北京大學、貴陽醫(yī)學院、中國農業(yè)大學
  天津疾控中心、江南大學、山東大學、青島大學 、香港大學
  云南省產品質量監(jiān)督檢驗研究院
七 其他優(yōu)勢產品介紹：